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细胞生长缓慢怎么办?
点击次数:117 发布时间:2019-07-26

细胞长得慢是什么情况?

五分pk拾小伙伴们可能经历过:不做实验时,细胞成长迅速;当做实验时,自己的细胞似乎是睡着了这个时候我该怎么办?

为了让我们的细胞茁壮成长,我们自然要找到问题,想个办法! 细胞生长缓慢的常见原因:

(1)培养基可能缺乏细胞生长所需的某种因子。通常情况下,当小伙伴购买细胞,并没有按照ATCC或国内细胞库推荐的方法制备培养基,使用实验室兄弟姐妹使用的培养基来培养细胞。解决方法一般是按照推荐的方法制备培养基,或直接购买培养细胞的培养基。

(2)细菌、支原体、真菌等污染:虽然培养基中通常添加双抗体(青霉素和链霉素),但如果无菌操作观念不强,仍有可能造成污染。处理方法:如果有冷冻细胞,可以丢弃污染细胞。当然,丢弃并不是随意的,扔进垃圾桶。应按照实验室生物安全规定进行。然后复苏培养物,建议培养箱完全消毒。如果不冷冻,而且这种细胞非常珍贵,常用的治疗方法是药物治疗:细菌污染加5-10倍的抗生素;真菌污染加抗真菌药物;支原体污染再加上抗支原体药物,具体药物可以咨询技术支持,他们会更加专业。

(3)许多细胞的生长依赖于密度。如果传代后细胞密度过小,也会影响细胞生长。这段时间没有什么特别好的,就是更换液体。如果细胞培养瓶为T75,则可以消化、离心、复苏,然后接种到T25瓶中。

(4)冷冻细胞中添加DMSO(二甲基亚砜)的量不正确,没有逐渐梯度冷却。下一次恢复后的细胞总是坏的。

处理方法: 按推荐的冷冻保存方法制备冷冻液。部分细胞适合10% DMSO,部分细胞适合5% DMSO;严格遵循渐变冷却的原则,细胞恢复后迅速解冻。

(5)换液间隔时间太长。一些小伙伴真的把细胞“佛”系生长。当他们想到它的时候,才会换下液体,相信一个句子。“你已经是一个成熟的细胞了。你应该学会养活自己,成长”。在这种情况下,细胞培养瓶中积累了大量的细胞代谢废物,影响细胞活性。推荐:勤奋点 。

五分pk拾(6)细胞的“消化”时间不宜过长,减少对细胞的损伤;此外,EDTA一般添加到胰腺酶中,螯合钙离子,影响细胞粘附。治疗方法:控制细胞“消化”时间,尽量去除干净的胰蛋白酶和EDTA。

PH值:细胞需要在一定的PH值下生长,这个小朋友知道。但是很多时候PH值是我们忽略的东西,这也是小秋今天想强调的一点。随着使用时间的增加,我们使用的介质可能会慢慢变成碱性!(当然,它也可能变酸,但改变碱是常见的)。一般来说,过碱的培养基会影响细胞的生长。治疗:最简单的方法就是更换新鲜的培养基!当然,如果你有时间和条件,你可以调整介质的pH值。

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