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复苏细胞,细胞不贴壁是为什么呢?
点击次数:319 发布时间:2019-07-24

Q:我从液氮中取出小瓶Huh7细胞,然后在37℃进行10分钟解冻,然后加入培养基+ 10%FBS,以 1000rpm离心5分钟以除去DMSO,然后将沉淀重新悬浮于新鲜培养基中。然后培养它。现在差不多4天 了,但细胞没有贴壁。大家能告诉我为什么细胞没有贴壁吗? 当我冻存细胞时,我将它们放入-80℃3天,然后将它们转移到液氮中。

A:我倾向于认为未成长的原因如下:

1细胞在解冻期死亡

2细胞冻存不当

3污染

4使用不适当的细胞生长培养基

细胞在37°C解冻的10分钟可能有点长。通常,如果使用水浴,3分钟就足够了。 关于细胞冻存,我认为在-80°C过夜就够了,然后转移至液氮中,不需要在-80°C放置三天。 

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